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          文氏巴爾通體探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

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          更新日期:
          2024-08-27
          點(diǎn)擊次數(shù):
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          產(chǎn)品特點(diǎn):
          文氏巴爾通體探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
            50次文氏巴爾通體探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

          客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

           產(chǎn)品名稱

          文氏巴爾通體探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

           英文名稱

           Bartonella vinsonii

           貨號(hào)

           YSP96430

          熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
          產(chǎn)品僅用于科研本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
          樣品RNA的抽提:
          ①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
          ②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
          ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
          ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
          ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
          2 RNA質(zhì)量檢測(cè)
          1)紫外吸收法測(cè)定
          先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
          ① 濃度測(cè)定
          A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。
          TCEP;三-(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽NLRC4 (D5Y8E) Rabbit mAb四氟酸鋰

          N,N-二甲酰(分子生物學(xué)級(jí))IL-1β (D4T2D) Rabbit mAb (Mouse Specific)2-氟-硝

          硫代硫酸鈉五水(AR)Phospho-Smad1 (Ser463/465)/ Smad5 (Ser463/465)/ Smad9 (Ser465/467) (D5B10) Rabbit mAb (PE Conjuga)2-氯-基-4,6-二甲基吡啶

          化鈉(AR)Smad1 (D59D7) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)2,5-二甲基-己炔-2,5-二

          可溶性淀粉Phospho-Src (Ser17) (D7F2Q) Rabbit mAb2-溴-6-氟甲

          硫脲Phospho-Bim (Ser77) (D4H12) Rabbit mAb1-N-Boc-吖丁啶羧酸

          氯化鈷六水(分子生物學(xué)級(jí))Keratin 17/19 (D4G2) XP® Rabbit mAb1-Boc-基氮雜環(huán)丁烷

          氯化鈷六水(AR)FIP200 (D10D11) Rabbit mAb2-溴-氟甲

          酚,酚Phospho-DARPP-32 (Thr34) (D27A4) Rabbit mAb硫異煙

          異戊CD82 (D7G6H) Rabbit mAb羥基乙

          醋酸鋰,二水(AR)S5a/PSMD4 (D20B2) Rabbit mAb噻唑-2-甲酸

          聚蔗糖400MTMR3 Antibody3,5-二氟芐酰溴

          二硝基水楊酸PSMA3 (D4Y9O) Rabbit mAbS-Boc-氨甲基吡咯烷

          二酸鈉CK1ε Antibody2-(叔丁氧羰基氨基)-哌啶

          酸二氫鈉二水Puma (D30C10) Rabbit mAb1-Boc-磺酰氧基哌啶

          二酸(AR)Puma (D30C10) Rabbit mAbN-Boc-羥基氮雜環(huán)丁烷

          氯化錳四水LIS1 Antibody2-氟-5-(三氟甲基)酚

          葡聚糖凝膠S-100 HRVDAC (D73D12) Rabbit mAb (HRP Conjuga)氯-乙基酚
          文氏巴爾通體探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒ECM1  細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1抗體100 ul

          豚鼠甘油-3-酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒ECP  嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白抗體100 ul

          豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒ED-1  外胚層發(fā)育不良抗體100 ul

          豚鼠鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒EDNRA  內(nèi)皮素受體A抗體100 ul

          豚鼠端粒酶()ELISA試劑盒EEF2  真核翻譯延長(zhǎng)因子2抗體100 ul

          豚鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒Phospho-EEF2 (Thr56)  酸化真核翻譯延長(zhǎng)因子2抗體100 ul

          豚鼠膽脂酶(CHE)ELISA試劑盒EEF2k  真核延伸因子激酶2抗體100 ul

          豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒Phospho-EEF2k (Ser366)  酸化真核延伸因子激酶2抗體100 ul

          豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒EGFR  表皮生長(zhǎng)因子受體抗體100 ul
          實(shí)驗(yàn)過程:
          一、試劑準(zhǔn)備
          1. DNA模板
          2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
              10×PCR buffer             5μl
                dNTP mixl                 4μl
                引物1(10pM)               2μl
                引物2(10PM)              2μ
                Taq酶(2U/μl)            1μl
                DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
                加ddH2O至               50 μl
             視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
          3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
          4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)
          三、注意事項(xiàng)
          1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
          2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
          3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

           

          產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 文氏巴爾通體 染料法 熒光PCR檢測(cè)試劑盒
           如果你對(duì)50次文氏巴爾通體探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系:

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