犬輪狀病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒

樣品RNA的抽提：
①產品僅用于科研取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1）紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為：A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術：
本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設有限位凸起，下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋，側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設有環形凸起，兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內部設有固定桿，固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。
乙(梯度色譜級, ≥99.9%)ENPP1 (L520) Antibody二氯二己基硅烷

無水乙(無水級, 99.9%,H2O≤10ppm)Histone Deacetylase 1 (HDAC1) AntibodyDL-氨酰甘氨酸

無水乙(H2O:20-30ppm)IQGAP1 (D8K4X) XP® Rabbit mAb吲哚-酸

無水乙(無水級, 99.8%,H2O：30-50ppm)IQGAP1 (D8K4X) XP® Rabbit mAb羥基-2-甲基喹啉

茴香(分析標準品，用于萜分析，≥99.5% (GC))WIF1 Antibody(R)-羥基-2

氨基-(三氟甲基)甲(98%)Ribosomal Proin L26 Antibody反式-基環己烷甲酸

乙(LC-MS)MRPL11 (D68F2) XP® Rabbit mAb4,4'-雙[N-(1-萘基)-N-氨基]-4''-基三

甲中標樣(分析標準品 基體：甲)eIF4E (C46H6) Rabbit mAb1,二甲基-2-(2-噻吩基)咪唑烷

2-氨基-乙基吡啶(97%)eIF4E (C46H6) Rabbit mAb2,二甲基呋喃

N,O-雙(*基硅烷基)三氟乙酰(96%)eIF3C Antibody氯-2-氟甲

山崳酸(標準品)DLK1 Antibody2,3,6-三氟溴芐

對溴氯(標準品)ENPP1 Antibody (Human Specific)三五氟酯

溴酚(標準品)Met (D1C2) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)1,二異基

對醌（用于光譜測定,≥99.5%(HPLC)）Mili Antibody吡啶-磺酸鈉

乙基叔丁基(標準品)MATK/CHK (D2I6U) Rabbit mAb8-甲氧基-并[g]

對羥基甲酸正丁酯(標準品)Histone Deacetylase 4 (HDAC4) Antibody2-羥基-3,5,5-*基-2-環己-1-酮

溴代異烷(標準品)Naked2 (C67C4) Rabbit mAbN-(METHOXYBENZYL) BORONOBENZAMIDE

乙酸芐酯(標準品)Naked2 (C67C4) Rabbit mAb氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯
犬輪狀病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒KLF8  KLF樣轉錄因子8抗體100 ul

κB抑制蛋白激酶(IKK)ELISA試劑盒KLF9  轉錄因子KLF9抗體100 ul

γ谷氨酰轉移酶(GGT)ELISA試劑盒KLF13/RFLAT-1  腸道內富含的Kruppel樣因子13100 ul

γ-谷氨酰環化轉移酶(GGCT)ELISA試劑盒KLH  血藍蛋白抗體100 ul

γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)ELISA試劑盒KLH  血藍蛋白抗體100 ul

γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒KLK1  激肽釋放酶1抗體100 ul

γ干擾素誘導單核細胞因子(MIG/CXCL9)ELISA試劑盒kappa Opioid receptor  kappa型阿片受體抗體100 ul

γ干擾素受體(IFN-γR)ELISA試劑盒mu Opioid receptor  µ-型阿片受體抗體100 ul

γ干擾素(IFN-γ)抗體ELISA試劑盒Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375)  酸化µ-型阿片受體抗體100 ul