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          捻轉毛細線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

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          更新日期:
          2024-08-21
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          產品特點:
          捻轉毛細線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
            50次捻轉毛細線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

          客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

           產品名稱

          捻轉毛細線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

           英文名稱

           Capillaria contorta

           貨號

           YSP96518

          熒光定量PCR試劑盒技術:
          產品僅用于科研本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設有限位凸起,下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋,側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設有環形凸起,兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內部設有固定桿,固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
          樣品RNA的抽提:
          ①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
          ②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
          ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
          ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
          ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
          2 RNA質量檢測
          1)紫外吸收法測定
          先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
          ① 濃度測定
          A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。
          2-丁酮(標準品)LEDGF (C57G11) Rabbit mAb氯-氟酚

          丁基三氯化錫(標準品)MCF2/Dbl Antibody蓖麻油酸鈉

          鄰二甲酸二(2-甲氧基)酯(標準品)CDK7 Antibody2-氨基-4,6-二氯-5-甲酰氨基嘧啶

          滅草松標準溶液(0.100mg/ml,,溶劑:酮)Centrin-2 Antibody氯-4'-氟丁酮

          1-正丁氨酰-2-并咪唑氨酸甲酯(97%)SCF (C19H6) Rabbit mAb2,5-二基-1,醌

          硫標準溶液(0.100mg/ml)HMGCS2 (D3U1A) Rabbit mAb溴甲酸甲酯

          丁草標準溶液(0.100mg/ml)Rab7 Antibody甲磺酰氨基酸頻那酯

          丁草(標準品)RhoB Antibody降莰烷

          丁草標準溶液(100μg/ml,u=4%)RhoB Antibody氯乙

          丁草標準溶液(10μg/ml,u=7%)ADAM9 Antibody溴甲后馬托品

          炔草隆(標準品)Phospho-Src Family (Tyr416) Antibody甲基-1-萘乙酮

          溴螨酯標準溶液(100μg/ml,u=2%)Phospho-Src Family (Tyr416) Antibody硝基-O-

          溴螨酯標準溶液(10μg/ml,u=2%)Non-phospho-Src (Tyr416) (7G9) Mouse mAb2-氯-三氟

          溴硝(標準品)Non-phospho-Src (Tyr416) (7G9) Mouse mAb1,-二-間-甲磺酸鹽

          氟草(標準品)eIF2α (L57A5) Mouse mAb(2R)-6-(四氫-2H-吡喃-2-氧基)-2,5,7,8-四并二氫吡喃-2-羧酸琥珀酰亞酯

          并(k)熒蒽(標準品)Grp94 Antibody2-溴-5--甲基吡啶

          并[g,h,i]芘(標準品)Grp94 Antibody氯甲酸十二烷基酯

          水質標樣(濃度范圍:1.20-2.03(mg/L),分析標準品)Phospho-Src (Tyr527) Antibody靠曼酸
          捻轉毛細線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒K-ras  原癌基因K-ras抗體100 ul

          β-微精原蛋白(MSMB/PRSP)ELISA試劑盒KSR1  Ras信號轉導KSR1蛋白抗體20 ul

          β糖蛋白抗體IgG ELISA試劑盒Phospho-KSR1 (Ser392)  酸化Ras信號轉導KSR1蛋白抗體100 ul

          β羥丁酸(β-OHB)ELISA試劑盒Ku70  DNA修復酶Ku70抗體100µl

          β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒Ku-80  DNA修復酶Ku-80抗體100 ul

          β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒Kv1.3/PCN3  離子通道蛋白Kv1.3抗體1Kit

          β萘酚(β-naphthol)ELISA試劑盒Kv3.3/Kcnc3  離子通道蛋白Kv3.3抗體100 ul

          β內啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒KCNC4/KV3.4  離子通道蛋白Kv3.4抗體100 ul

          β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒Laminin alpha 5  層粘蛋白α5抗體20 ul
          實驗過程:
          一、試劑準備
          1. DNA模板
          2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
              10×PCR buffer             5μl
                dNTP mixl                 4μl
                引物1(10pM)               2μl
                引物2(10PM)              2μ
                Taq酶(2U/μl)            1μl
                DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
                加ddH2O至               50 μl
             視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
          3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
          4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
          三、注意事項
          1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
          2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
          3.產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

           

          產品相關關鍵字: 捻轉毛細線蟲 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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