扇革蜱通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
N-α-酰轉(zhuǎn)移酶30(NαA30)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　板栗蛇孢日規(guī)殼　25g

Notchless蛋白(NLE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　苜蓿中華根瘤菌　500g

Rho蛋白2(RHPN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　日本根霉　100ml

視黃醇脫氫酶13(RDH13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳)　25ml

視黃醇脫氫酶14(RDH14)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　球孢白僵菌　500ml

腺苷酸激酶7(AK7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥97%　金黃色葡萄球菌金黃亞種　1g

連接蛋白4(JPH4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥97%　白僵菌　250mg

核糖核酸酶A9(RNASE9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　>98.0%(GC)　紅曲霉　25g

Anoctamin 9蛋白(ANO9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　>98.0%(GC)　大腸埃希菌　5g

N-去酰化酶/磺基轉(zhuǎn)移酶4(NDST4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　亞細(xì)亞菌屬　1g

Clarin 3蛋白(CLRN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　枯草芽孢桿菌　5g

轉(zhuǎn)位因子蛋白2(TSPO2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　杏鮑菇　1g

半椎蛋白2(HMCN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　膠孢　5g

Akirin 2蛋白(AKIRIN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　非無菌藥品  金黃色葡萄球菌（陽性）　25g

親核素α7(KPNα7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　Flavobacterium　5g

泛核蛋白2(UBN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　微紅微球菌　25g

鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(SGLT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　根瘤菌屬　5g

肌腱蛋白N(TNN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　96%　糞產(chǎn)堿菌糞亞種　100g
扇革蜱通用探針法熒光PCR檢測試劑盒DNA酶1樣蛋白1抗體GPA33(glycoproin A33 transmembrane)  糖蛋白A33(跨膜)抗原500 ul

抗菌蛋白DCD抗體glypican 1  脂酰基醇蛋白聚糖-1抗原1 Kit

肌動蛋白解聚因子抗體GPC3(glypican 3; Instinal proin OCI-5; GTR2-2; MXR7)  脂酰基醇蛋白聚糖-3(多肽)100 ul

甘油二酯酰基轉(zhuǎn)移酶2抗體Glypican 4(Glypican prooglycan 4)  脂酰基醇蛋白聚糖-4抗原100 ul

DHX15蛋白抗體GRB2/ASH peptide  生長因子受體結(jié)合蛋白2抗原300 ul

DIAPH2蛋白抗體GZMB/CCPI(Granzyme B)  顆粒酶B抗原100 ul

酸化蓬亂蛋白2抗體UTS2R/GPR14(Uronsin II receptor：G Proin Coupled Receptor 14)  G蛋白偶聯(lián)受體14抗原100 ul

Wnt通路抑制因子2抗體GPR30(G Proin Coupled Receptor 30)  G蛋白偶聯(lián)受體30抗原300 ul

酸化B淋巴細(xì)胞銜接分子DAPP1抗體GnRHR peptide  促性腺激素釋放激素受體抗原100 ul