牛痘病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒

特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化。而在平臺期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
(R)-(-)-N-(3,5-二甲酰)-α-甘氨酸(>98.0%(HPLC)(T))Cathepsin B (D1C7Y) XP® Rabbit mAb甲基三乙氧基硅烷

(1S,2S)-(-)-1,2-二基乙二(>98.0%(GC)(T))Cathepsin B (D1C7Y) XP® Rabbit mAb溴-3,5-二氟

(1R,2R)-(+)-1,2-二基乙二(>97.0%(GC)(T))Phospho-Progesrone Receptor (Ser190) Antibody3,二甲氧基酚

(1R,2R)-(-)-N,N'-二甲基環(huán)己烷-1,2-二(>94.0%(GC))Progesrone Receptor (6A1) Mouse mAb2-氨基-5-溴噻唑

(1S,2S)-(+)-N,N'-二甲基環(huán)己烷-1,2-二(>98.0%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr771) (76D6) Rabbit mAb氯硫酚

(R)-(+)-α-甲基芐基異酸酯(>98.0%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr771) (76D6) Rabbit mAb溴乙

異酸(S)-(-)-α-甲基芐酯(>95.0%(GC))PDGF Receptor α (D1E1E) XP® Rabbit mAb2-氯-6-氟酚

異酸(R)-(-)-1-(萘基)乙酯(>90.0%(GC))PDGF Receptor α (D1E1E) XP® Rabbit mAb氟-三氟甲

異酸(S)-(+)-1-(1-萘基)乙酯(>95.0%(GC))PDGF Receptor β (2B3) Mouse mAb環(huán)己烷

(S)-(+)-α-甲氧基(>98.0%(GC)(T))CD3 (UCHT1) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjuga)2,6-二氯芐基溴

(R)-(-)-α-甲氧基(>98.0%(GC)(T))Progesrone Receptor A/B Antibody乙酰基酸

(R)-(+)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)(>98.0%(GC)(T))Di-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C64G9) Rabbit mAb (PE Conjuga)鄰二乙

(S)-(-)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)(>98.0%(GC)(T))BiP (C50B12) Rabbit mAb1-癸烷

(+)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)乙酰氯(>98.0%(GC))BiP (C50B12) Rabbit mAb氨基-氯吡啶

(-)-α-甲氧基-α-（三氟甲基）乙酰氯(>98.0%(GC))Progesrone Receptor B Antibody酸酐

(+)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)酐(>95.0%(T))Phospho-PERK (Thr980) (16F8) Rabbit mAb3,二氯

(R)-(-)-2-甲氧基-2-(1-萘基)酸(>99.0%(HPLC))Phospho-PERK (Thr980) (16F8) Rabbit mAb2-溴-基吡啶

(S)-(+)-2-甲氧基-2-(1-萘基)酸(>99.0%(HPLC))Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAbD-天冬酰一水物
牛痘病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒雞白介素2(IL-2)ELISA試劑盒Phospho-PLC beta3 (Ser1105)  酸化酯酶Cβ3抗體100 ul

雞白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒PKC beta 1/2  蛋白激酶C beta 1/2抗體100 ul

雞白介素18(IL-18)ELISA試劑盒phospho-PKC (Thr500)  酸化蛋白激酶C(T500)抗體100 ul

雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒phospho-PKC beta 1/2(Thr500)  酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗體20 ul

雞白介素15(IL-15)ELISA試劑盒Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641)  酸化蛋白激酶C α/β2抗體100 ul

雞白介素12(IL-12/70)ELISA試劑盒PKC alpha  蛋白激酶C α抗體20 ul

雞白介素10(IL-10)ELISA試劑盒PLCG 2/PLC gamma 2  酯酶Cγ2抗體100 ul

雞白介素1(IL-1)ELISA試劑盒Phospho-PLC gamma 2 (Tyr1217)  酸化酯酶Cγ2抗體100µl

雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759)  酸化酯酶Cγ2抗體100 ul