山羊皰疹病毒通用探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
仲丁(Standard for GC,≥99.8%(GC))Mnk1 (C4C1) Rabbit mAb(R)-1,2-

聯(lián)(Standard for GC,>99.5%(GC))ESET (C1C12) Rabbit mAb4,二甲基環(huán)己酮

1，丁二(BDO)(standard for GC,≥99%(GC))ESET (C1C12) Rabbit mAb6-氯尿嘧啶

正丁酸(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-Chk2 (Thr68) (C13C1) Rabbit mAb叔丁基馬來酸酯

正丁(Standard for GC,≥99.7%(GC))Phospho-Chk2 (Thr68) (C13C1) Rabbit mAb2-環(huán)戊基-2-羥基

(Standard for GC)RPA70/RPA1 (4D9) Rat mAb4,6-二氯-1H-吡唑并[3,C]嘧啶

甲酸丁酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))MRPL11 Antibody溴-氯甲酸

二乙二丁(standard for GC,≥99.5%(GC))Etoposide2-(甲酰基基)-

甲基酸丁酯(Standard for GC,>99.5%(GC))Naked1 (C30F10) Rabbit mAb2-溴-4甲基芐

酸叔丁酯(standard for GC,≥99.5%(GC)Naked1 (C30F10) Rabbit mAb溴-甲

己酸丁酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Caspase-12 Antibody2-溴-5-

2-丁酮(Standard for GC, ≥99.9% (GC))Caspase-12 Antibody2-氨基-甲氧基甲酸

戊酸丁酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb氯-6-甲氧基喹啉

(standard for GC,≥99.9%(GC))TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb溴-1,1,1-三氟酮

乙酸丁酯(standard for GC,≥99.7%(GC))Borzomib4,6-二氯-5-甲基嘧啶

1,2,丁三（BT）(standard for GC,≥99.5%(GC))Jagged2 (C83A8) Rabbit mAb對(duì)二三氟甲

間氯(standard for GC,>99.5%(GC))TCF1/TCF7 (C46C7) Rabbit mAb氟-5-溴酚

環(huán)己烷(Standard for GC,≥99.9%(GC))Shh (C9C5) Rabbit mAb1,2-雙(三氟甲基)
山羊皰疹病毒通用探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒LIFR/CD118  白血病抑制因子受體抗體100 ul

α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒Lingo-1  Nogo受體反應(yīng)蛋白抗體1 Kit

α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒LIMK1  單絲氨酸蛋白激酶1抗體100 ul

α2-HS糖蛋白(AHSG)抗體ELISA試劑盒Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505)  酸化單絲氨酸蛋白激酶1/2抗體100 ul

α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)ELISA試劑盒LIR-6  白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體6抗體100µl

α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒LIR-8/CD85c/LILRB5  白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體8抗體500 ul

α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒LIS1  無腦回的致病基因LIS1抗體100 ul

α1抗胰蛋白酶(α1-AT)ELISA試劑盒LILRB3/CD85a/PirB  白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體-B抗體20 ul

α1防御素(DEFA1)ELISA試劑盒LIX1  LIX1抗體5 mg