魯氏不動桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
己烯雌酚()（標準品）C20H17,1,3,四甲氧基烷

多烯紫杉無水/多西他賽C32H50O5四十八烷

多烯紫杉無水/多西他賽（標準品）C36H62O9(異酰氧)基*氧基硅烷

多烯紫杉三水合物C42H72O131,1,3,四乙氧基烷

多烯紫杉三水(標準品)C36H62O81,2-雙(氯二甲基硅烷基)乙烷

鹽酸多奈哌齊III型C30H52O33,9-雙(十八基氧基)-2,4,8,10-四氧-3,9-二磷雜螺環(huán)[5,5]十一烷(SPEP)

鹽酸多奈哌齊III型(標準品)C15H24N2O21,雙(二苯膦基)烷

達馬莫德C20H28O41,雙(二苯膦基)丁烷

鹽酸多佐胺；鹽酸杜塞酰胺C28H32O162,2-雙[(氨基苯氧基)苯基]烷

鹽酸多佐胺；鹽酸杜塞酰胺（標準品）C23H28O11甲基庚烷

甲磺酸多沙唑C15H26O2甲基庚烷

甲磺酸多沙唑（標準品）C27H30O142-甲基庚烷

鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素C25H24O51-甲基吡咯烷

鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素(標準品)C16H22O101,2,三溴烷

鹽酸強力霉素/鹽酸多西環(huán)素C12H16N2O1,1,1-三(羥甲基)乙烷

鹽酸強力霉素/鹽酸多西環(huán)素（標準品）C15H10O72,2,2-三氟乙烷

維生素K3,甲萘醌C27H44O3甲基*氧基硅烷

維生素K3,甲萘醌(標準品)C14H19NO8甲基二氯硅烷
魯氏不動桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒12(IL-12/P70)ELISA試劑盒AD7C-NTP  神經(jīng)絲蛋白抗體100 ug

12(IL-12/P40)ELISA試劑盒ADAMTS1  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體100 ul

10(IL-10)ELISA試劑盒ADAMTS7  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體100 ul

1(IL-1)ELISA試劑盒ADAMTS7(NT)  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體 (N端抗體)100 ug

豬白蛋白ELISA試劑盒DRADA (N terminal)   雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（N端）100 ug

豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒DRADA (C terminal)  雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（C端）100 ug

豬γ淀粉酶(AMY)ELISA試劑盒Adducin protein  內(nèi)收蛋白抗體100 ug

豬β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒ADK/AK  腺苷酸激酶抗體100 ug

豬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒AEG-1  AEG-1抗體100 ug