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          網(wǎng)尾線蟲通用探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒

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          更新日期:
          2020-11-27
          點(diǎn)擊次數(shù):
          822
          產(chǎn)品特點(diǎn):
          網(wǎng)尾線蟲通用探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
            50次網(wǎng)尾線蟲通用探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

          熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
          產(chǎn)品僅用于科研本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
          客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

           產(chǎn)品名稱

          網(wǎng)尾線蟲通用探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒

           英文名稱

           Dictyocaulus spp.

           貨號(hào)

           YSP96624

          樣品RNA的抽提:
          ①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
          ②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
          ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
          ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
          ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
          2 RNA質(zhì)量檢測(cè)
          1)紫外吸收法測(cè)定
          先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
          ① 濃度測(cè)定
          A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。
          實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
          一、試劑準(zhǔn)備
          1. DNA模板
          2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
              10×PCR buffer             5μl
                dNTP mixl                 4μl
                引物1(10pM)               2μl
                引物2(10PM)              2μ
                Taq酶(2U/μl)            1μl
                DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
                加ddH2O至               50 μl
             視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
          3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
          4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)
          三、注意事項(xiàng)
          1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
          2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
          3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
          L-組氨酸MCM2 (D7G11) XP® Rabbit mAb2-溴-6-氟甲

          L-氨酸MCM2 (D7G11) XP® Rabbit mAb5-氯吡-2-羧酸

          L-酪氨酸Presenilin 1 AntibodyN-乙基-哌啶酮

          L-酪氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)PSD95 (7E3) Mouse mAb5-溴-2-酚

          L-谷氨酸β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-氟-溴吡啶

          L-谷氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)異

          L-谷氨酸(sigma)NUT (C52B1) Rabbit mAb2-氯-5-并噻唑

          DL-谷氨酸CD11c (3.9) Mouse mAb (APC Conjuga)2-氯-并噻唑

          肌氨酸Ingrin β5 (D24A5) Rabbit mAb1-溴-3,二甲氧基烷

          甘氨酸-DL-亮氨酸Ingrin β5 (D24A5) Rabbit mAb2',3'-異叉腺苷

          L-亮氨酰甘氨酸RalBP1 (I33) Antibody5-乙酰基-2-甲基吡啶

          蒜氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Nicastrin Antibody3,二乙酮

          L-脯氨酸ALK (D5F3®) XP® Rabbit mAb環(huán)戊

          DL-纈氨酸ALK (D5F3®) XP® Rabbit mAb2,5-二氟

           L-亮氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Tuberin/TSC2 (28A7) Rabbit mAb氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽

          L-亮氨酸Histone H2A (L88A6) Mouse mAb鄰三氟肼

          DL-賴氨酸CD14 (61D3) Mouse mAb (APC Conjuga)六水硝酸銩

          DL-精氨酸鹽酸鹽Histone H3 (96C10) Mouse mAb2,二氟氯
          網(wǎng)尾線蟲通用探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒SLT/SLT-IIe/O139  豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體500 ul

          分泌型脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒SLC39A6  SLC39A6抗體100 ul

          肺炎支原體(MP)抗體ELISA試劑盒Slug  鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體100 ul

          肺炎病毒抗體(PV-Ab)ELISA試劑盒SLC40A1/FPN1  細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC40A1抗體500 ul

          肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒SLC44A1/CD92  溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族44成員1抗體100 ul

          肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒Smad1  細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體100 ul

          肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒Phospho-Smad1 (Ser206)  酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體20 ul

          肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)  酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體100 ul

          肺癌腫瘤抑制因子1(TSLC1)ELISA試劑盒Smad2/3  細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-2/3抗體100 ul

           

          產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 網(wǎng)尾線蟲通用 染料法 熒光PCR檢測(cè)試劑盒
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