鏈霉菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

熒光染料的優(yōu)點：
產品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化。而在平臺期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
超氧化物歧化酶（SOD）活性檢測試劑盒（附標準樣）　KDM2A ELISA Kit　1 Kit

超氧化物歧化酶（SOD）標準曲線測定試劑盒　EFCAB14(EF-hand calcium-binding domain-containing protein 14) ELISA Kit　100 ul

細胞內氧化應激活性氧（ROS）高質綠色熒光測定試劑盒　KDM3A/JMJD1A ELISA Kit　100 ul

細胞內氧化應激活性氧（ROS）初級綠色熒光測定試劑盒　KIAA0513 ELISA Kit　100 ul

活體組織氧化應激活性氧（ROS）高質綠色熒光測定試劑盒　KIF12 ELISA Kit　1 Kit

活體組織氧化應激活性氧（ROS）初級綠色熒光測定試劑盒　KIAA0528 ELISA Kit　100 ul

冰凍切片氧化應激活性氧（ROS）高質綠色熒光測定試劑盒　KIAA0895 ELISA Kit　100 ul

冰凍切片氧化應激活性氧（ROS）初級綠色熒光測定試劑盒　KIAA1033 ELISA Kit　100 ug

真菌/酵母細胞內氧化應激活性氧（ROS）高質綠色熒光測定試劑盒　KDM5D ELISA Kit　20 ml

真菌/酵母細胞內氧化應激活性氧（ROS）初級綠色熒光測定試劑盒　KHDC1 ELISA Kit　100 ml

植物細胞內氧化應激活性氧（ROS）高質熒光測定試劑盒　KHDC3L ELISA Kit　1 mg

植物細胞內氧化應激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒　KDSR ELISA Kit　100 ul

體液氧化應激活性氧（ROS）高質熒光測定試劑盒　KHSRP ELISA Kit　100 ul

體液氧化應激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒　KHDRBS3 ELISA Kit　300 ul

活體細胞氧化應激活性氧（ROS）原位染色試劑盒（超氧陰離子）　KIF1C ELISA Kit　100 ul

冰凍切片氧化應激活性氧（ROS）原位染色試劑盒（超氧陰離子）　KIF20A ELISA Kit　100 ul
鏈霉菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒酸化叉頭蛋白家族抗體PINP  I型前膠原肽100 ul

酸化叉頭蛋白3A抗體Collagen III  III型膠原100 ul

酸化叉頭蛋白3A抗體PIIICP  III型前膠原肽（C端）100 ul

酸化叉頭蛋白3A抗體PIIINP  III型前膠原肽（N端）20 ul

酸化叉頭蛋白家族1抗體Collagen IV  IV型膠原100 ul

酸化叉頭蛋白家族1抗體Collagen VI  VI型膠原100 ul

叉頭蛋白O4抗體HA  透明質酸100 ul

酸化叉頭蛋白4抗體LN  層粘連蛋白100 ul

FMS樣酪氨酸激酶3 Alpha-IFN－b (humen)  抗α干擾素受體300 assays
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產物量不能計算出初始模板量。