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          彎曲桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

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          更新日期:
          2020-11-25
          點擊次數(shù):
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          產(chǎn)品特點:
          彎曲桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
            50次彎曲桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

          熒光染料的優(yōu)點:
          產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
          可以與任何PCR產(chǎn)物結合;
          價格便宜;
          熒光染料的缺點:
          不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
          引物二聚體會影響檢測的敏感性
          非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性
          引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
          特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

          產(chǎn)品名稱

          彎曲桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

          英文名稱

           Campylobacter spp.

          貨號

           YSP96499

          ?
          熒光探針:
          Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
          正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結合到模板上,探針的結合位置位于上下游引物之間。
          當擴增延伸到探針結合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
          TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題,反應結束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
          TaqMan探針技術的優(yōu)點:
          熒光背景低;
          敏感性高;
          雜交穩(wěn)定性高;
          熒光光譜分辨率好;
          特異性高。
          TaqMan探針技術的缺點:
          成本高;
          設計難度大;
          只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
          由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
          ?
          熒光定量PCR原理:
          產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
          一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
          二十四烷酸甲酯(標準品)β-Amyloid (1-42 Specific) (D9A3A) Rabbit mAb氟溴乙基

          芥酸甲酯(標準品)β-Amyloid (pE3 Peptide) (D5N5H) Rabbit mAb5-氯-2-氟

          十九酸(標準品)β-Amyloid (pE3 Peptide) (D5N5H) Rabbit mAb5-氯靛紅酸酐

          油酸(標準品)CDCA2 (D7T4P) Rabbit mAb溴-羥基

          反式-9-十八酸甲酯(標準品)CENP-E Antibody氯-甲酸

          對位紅(標準品)Phospho-Rad18 (Ser403) (D2T6W) Rabbit mAb4'-氟-3'-乙酮

          巖芹酸(標準品)IRGM Antibody (Rodent Specific)α-異基對乙酸

          D-泛(標準品)eRF3 AntibodyFmoc-L-基甘氨酸

          糖精鈉標準溶液(1.00mg/mL,基體:純水)TPP2 Antibody1,6-二氯己烷

          桃(標準品)Akt3 (E1Z3W) Rabbit mAb2-溴-(三氟甲基)

          甲基壬酮(標準品)PTMScan® Phospho-Ser-Pro-Pro Motif [pSPP] Kit2-硝基-9,9-二甲基芴

          2′-脫氧胞苷 鹽酸鹽PTMScan® Phospho-MAPK Substra Motif [PXpTP] Kit奧氮平

          2,2,3,3,五氟-1-OX40L (D6X2D) Rabbit mAb1-叔丁氧羰基-氨基哌啶鹽酸鹽

          1,1,2-三氯三氟乙烷(CFC-113)MLKL (D2I6N) Rabbit mAb二甲酰肼

          (標準品)Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb2-氨基-氯二

          標準溶液(標準品)Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb5-溴吡啶-(N-乙基)甲酰

          酸氫二銨Stat1 (D4Y6Z) Rabbit mAb雙三氟磺酰亞銀鹽

          Amberli?IRA402 強型陰離子交換樹脂(氯型)MCU (D2Z3B) Rabbit mAbD-2-羥基酸
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          補體因子B前體(pre-CFB)ELISA試劑盒IL-17C  白介素-17C抗體100 ul

          補體片斷5b(C5b)ELISA試劑盒IL-17D/IL-27  白介素-17D抗體100 ul

          補體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒IL-17E/IL-25  白介素-17E抗體100 ul
          PCR技術的定量原理:
          擴增曲線
          在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
          在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
          PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。

          產(chǎn)品相關關鍵字: 彎曲桿菌 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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