牛型放線菌PCR檢測試劑盒說明書

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

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特點(diǎn)優(yōu)勢：
    1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實(shí)用性：產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 包裝;1g

纖溶酶/纖維蛋白溶酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g

纖連蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR，細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) 包裝;5g

纖連蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g

纖調(diào)蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：純度>99% 包裝;5g

細(xì)小病毒B19試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 包裝;1g

細(xì)胞周期素A2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測定 包裝;25g

細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR 包裝;5g

細(xì)胞周期蛋白A1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,用于細(xì)胞培養(yǎng),藥劑造模 包裝;1g

細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg

細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;250mg

細(xì)胞纖維連接蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：≥675 U/mg,USP28 包裝;1g

細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 包裝;5g

細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR 包裝;25g

細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g

細(xì)胞色素P450試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：≥99.0% ,水合物 包裝;1g

細(xì)胞色素c氧化酶亞基VIB多肽1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g
牛型放線菌PCR檢測試劑盒說明書Ganoderma│lucidium 中文名稱：靈芝種屬:Ganoderma│lucidium提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于食用菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0017生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；定期移植法 純度：98%

Pleurotus│ostreatus 中文名稱：糙皮側(cè)耳種屬:Pleurotus│ostreatus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于食用菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0017生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；定期移植法 純度：99%

Gloeostereum│incarnatum 中文名稱：膠韌革菌(榆耳，榆蘑)種屬:Gloeostereum│incarnatum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用，藥用。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0017生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；定期移植法 純度：99%

Trichosporon│asahii 中文名稱：阿氏絲孢酵母種屬:Trichosporon│asahii提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度：99%

Actinomucor│elegans 中文名稱：雅致放射毛霉種屬:Actinomucor│elegans提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:制腐乳。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Monascus anka 中文名稱：紅曲紅曲（斜面）種屬:Monascus anka提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:紅色素。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基:：麥芽膏粉130g，瓊脂15g，氯霉素0.1g，蒸餾水1L，pH6.0±0.2，121℃，15min。生長條件:30-35℃，好氧，產(chǎn)少量橙色孢子存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Corynebacterium│stationis 中文名稱：停滯棒桿菌種屬:Corynebacterium│stationis提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:溶菌試驗(yàn)。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Bacillus│polymyxa 中文名稱：多粘芽孢桿菌種屬:Bacillus│polymyxa分離基物:活性污泥提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于污水處理培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%