所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1、樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2、擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMDRT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1μl(也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMDRT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20u至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
PCR核酸檢測(cè)試劑盒的技術(shù)參數(shù)：
1.符合SN/T1686-2005《新城疫病毒中強(qiáng)毒株檢測(cè)方法:熒光RT-PCR法》的檢測(cè)要求，可用于禽肉、禽類(lèi)組織臟器、禽類(lèi)排泄和分泌物，及其泄殖腔和咽喉拭樣中新城疫病毒的檢測(cè)。
2.靈敏度:對(duì)于接種的雞胚尿囊液，檢測(cè)的zui高稀釋度可達(dá)10-8~10-7，與雞胚病毒分離方法的靈敏度接近。定量檢測(cè)線(xiàn)性范圍可達(dá)10-1010拷貝/ml。
3.特異性:采用新基因序列數(shù)據(jù)庫(kù)設(shè)計(jì),并通過(guò)系統(tǒng)驗(yàn)證，新城疫病毒RT-PCR能夠檢測(cè)所有己知新城疫病毒毒株。對(duì)于其它禽類(lèi)感染因子，本試劑盒檢測(cè)結(jié)果為陰性。
4.產(chǎn)品盒組成:(不包括新城疫病毒RNA提取試劑,用戶(hù)可采用通用型病毒RNA提取試劑盒或試劑盒推薦的提取方法。)組成成份規(guī)格數(shù)量RNA提取液30ml1瓶DEPC水5ml1瓶新城疫病毒RT-PCR一步法反應(yīng)液920ul1管逆轉(zhuǎn)錄酶管TaqHS酶管新城疫病毒陽(yáng)性對(duì)照100ul1管新城疫病毒陰性對(duì)照100ul1管使用說(shuō)明書(shū)一份。
會(huì)員_a.png)