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          小鼠ELISA試劑盒的操作步驟是怎樣的?

          點擊次數:385 更新時間:2023-07-13
           
            小鼠ELISA試劑盒是一種常用的實驗方法,用于檢測小鼠樣本中特定蛋白質的濃度。下面是一般的小鼠ELISA試劑盒操作步驟:
           
            1、樣本處理:
           
            a.收集小鼠組織或液體樣本,如血清、血漿或細胞上清。
           
            b.將收集的樣本置于離心管中,并離心10-15分鐘以去除固體顆粒和細胞殘渣。
           
            c.將上清轉移到新的離心管中,避免帶入沉淀。
           
            d.如有必要,將樣本進行稀釋,以確保其濃度處于試劑盒檢測范圍內。
           
            2、準備試劑:
           
            a.將試劑盒中的所有試劑和標準物品室溫恢復至室溫。
           
            b.打開并標記試劑瓶,以避免混淆。
           
            c.預先稀釋試劑盒中的穩定洗滌緩沖液,按照說明書中的建議進行稀釋。
           
            3、酶標板涂層:
           
            a.取出所需數量的酶標板,并用洗滌緩沖液洗滌。
           
            b.向每個酶標板孔中加入所需的涂層抗體或其他適當的試劑。
           
            c.封閉孔板,并在37°C下靜置1-2小時,或根據說明書上的指導進行孵育。
           

          小鼠ELISA試劑盒

           

            4、洗滌:
           
            a.將洗滌緩沖液加入洗滌緩沖液槽中。
           
            b.倒掉洗滌緩沖液槽中的液體,將酶標板孔倒置在紙巾上以排出殘留液體。
           
            c.將每個孔部分填滿洗滌緩沖液,然后輕輕拍打孔板以去除液體。
           
            d.重復以上步驟3次,確保充分洗滌。
           
            5、樣本添加:
           
            a.向每個酶標板孔中加入已稀釋的樣本、對照標準品和負對照。
           
            b.封閉孔板,并在室溫下孵育一段時間,按照說明書上的要求進行。
           
            6、洗滌:
           
            a.重復步驟4中的洗滌步驟,以去除未結合的物質。
           
            7、底物加入:
           
            a.向每個酶標板孔中加入底物溶液。
           
            b.封閉孔板,并在室溫下進行孵育,按照說明書上的建議時間。
           
            8、停止反應:
           
            a.向每個酶標板孔中加入停止溶液,以終止化學反應。
           
            9、測量讀數:
           
            a.使用酶標儀測量各個孔的吸光度值,一般為450nm或其他特定波長。
           
            b.將吸光度值與標準曲線進行比較,計算樣本中目標蛋白質的濃度。
           
           
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