人CD44變體6ELISA檢測試劑盒洗滌方法：

1. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體，甩干，每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。

3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。

5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí)，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測程序。

9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HT-29

人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株；Mo7e

人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞；NCI-H157

人前列腺癌細(xì)胞；PC-3 [PC3]

人紅系白血病細(xì)胞；TF-1

人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；UACC812

人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞；UT-7

人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A-375 [A375]

人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；BT-474

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 205

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 320DM [COLO320DM]

人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞；Daudi

人十二脂腸腺癌；HuTu-80

人鼻咽癌細(xì)胞；CNE-2Z

人胎盤絨膜癌細(xì)胞；BeWo

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT 116 [HCT116]

人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞；Jurkat D,E

人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系；Jurkat77

人口腔表皮樣癌細(xì)胞；KB

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；LoVo

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；SW480 [SW 480；SW-480]

急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞；TALL-104

人腎癌細(xì)胞；A498

人宮頸癌細(xì)胞；C-33A

人宮頸癌細(xì)胞；Hela 229 [HeLa229]

人宮頸癌細(xì)胞；Hela P10s-11F

人宮頸癌細(xì)胞；Hela S3 [HeLaS3]

人胰腺腺泡上皮癌；HPAC

人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞；HuT 78

人肺鱗癌細(xì)胞；NCI-H520

人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PC-3M IE8

人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PC-3M-2B4

人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PG-BE1

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PG-LH7

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；SW620 [SW 620；SW-620]

人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤；U-87 MG [U87MG；U87 MG]

人肺癌細(xì)胞；A-427 [A427]

人胰腺癌細(xì)胞；AsPC-1

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；C918

人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞；Daoy

人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；HCC38

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；M619

人胃癌細(xì)胞；MGC-803

綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞；MGC803-GFP

人胃癌細(xì)胞；MKN-45

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；MuM-2B