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丹毒絲菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

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更新日期:
2020-11-05
點(diǎn)擊次數(shù):
946
產(chǎn)品特點(diǎn):
丹毒絲菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
  50T丹毒絲菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)的詳細(xì)資料:

實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

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產(chǎn)品名稱

丹毒絲菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

 英文名稱

 Erysipelothrix sppPCR

 貨號(hào)

 HE30969-R

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
    4.   實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
N-羥乙基乙二胺-N,N′,N′-三乙酸三鈉/氨乙基乙醇胺三乙酸三鈉/N-羥乙基乙二胺三乙酸三鈉/N-(2-羥乙基)乙二胺三乙酸三鈉/N-(2-羥乙基)乙二胺-N,N',N'-三乙酸三鈉/羥乙基乙烯二胺三乙酸三鈉/N-二-羥乙基-亞乙基二胺三乙酸三鈉/N-[2-[雙(羧甲基)氨基]乙基]-N-(2-羥乙基)-甘氨酸三鈉鹽/HEDTA-Na3 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;100g

乙二胺四乙酸二鈉鹽/四乙酸二氨基乙烯二鈉鹽/托立龍B/氨羧絡(luò)合劑III/螯合劑III/絡(luò)合酮II/ EDTA二鈉/N,N’-1,2-乙二基雙(N-羧基甲基)氨基乙酸二鈉鹽二合物/絡(luò)合劑EDTA二鈉/氨羧絡(luò)合亮劑Ⅲ/EDTA-2Na 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g

乙二胺四乙酸二鈉鈣鹽/乙二胺四乙酸鈣二鈉/EDTA二鈉鈣/依地酸鈣二鈉二合物/依地酸鈉鈣/EDTA 鈣鈉鹽/EDTA-2NaCa 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;500g

乙二胺四乙酸二鈉錳鹽/乙二胺四乙酸錳二鈉/EDTA二鈉錳/EDTA錳二鈉/EDTA錳鈉鹽/Ethylenediaminetetraacetic acid manganese disodium salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g

乙二胺四乙酸二鈉鋅鹽/乙二胺四乙酸鋅二鈉/EDTA二鈉鋅/Disodium zinc ethylenediaminetetraacetate tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;1g

乙二胺四乙酸二鈉銅鹽/乙二胺四乙酸銅二鈉/EDTA二鈉銅/乙二胺基四乙酸銅二鈉鹽/Ethylenediaminetetraacetic acid copper(II) disodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 包裝;250mg

乙二胺四乙酸四鈉鹽/EDTA四鈉鹽/EDTA tetrasodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;50mg

乙二胺四乙酸二鉀鹽/乙二胺四乙酸鉀/EDTA二鉀鹽二合物/EDTA-2K 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 包裝;25g

乙二胺四乙酸三鉀鹽/EDTA三鉀鹽二合物/EDTA-三鉀/EDTA-3K 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;5g

脂磷壁酸/Lipoteichoic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g

2-硫代巴比妥酸/4,6-二羥基-2-巰基嘧啶/丙二酰硫脲/2-硫代巴比土酸/4,6-二氧-2-巰基嘧啶/二氫-2-硫代-4,6(1H,5H)-嘧啶二酮/丙二烯縮硫脲/TBA 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g

三/三氟醋酸/過(guò)/全氟醋酸/TFA 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 包裝;25g

三/三氯醋酸/TCA 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;5g

棕櫚酸/軟脂酸/十六酸/鯨蠟酸/正十六烷酸/鯨乙酸/十六烷酸/Palmitic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;1g

檸檬酸/枸櫞酸/2-羥基丙羧酸/Citric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;250mg

無(wú)檸檬酸/枸櫞酸/2-羥基丙羧酸/Citric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;5g

α-酮戊二酸/2-酮戊二酸/2-氧代戊二酸/α-酮基戊二酸/2-氧代-1,5戊二酸/α-羰基戊二酸/2-氧代-1,5戊二酸/α-膠酮酸/α-Ketoglutaric acid 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T) 包裝;100g
丹毒絲菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)Trichosporon asahii 中文名稱:阿薩斯絲孢酵母種屬:Trichosporon asahii提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:YM 培養(yǎng)基:酵母提取物,3.0 g 麥芽提取物,3.0 g 葡萄糖,10.0 g 蛋白棟,5.0 g 瓊脂,20.0 g 蒸餾1000 ml ,pH 6.2 +/- 0.2生長(zhǎng)條件:25℃,好氧存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%

Mucor flavus 中文名稱:黃色毛霉種屬:Mucor flavus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:type of M. sciurinus培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:25℃,好氧存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥97% (HPLC)

Penicillium brasilianum 中文名稱:巴西青霉種屬:Penicillium brasilianum提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長(zhǎng)條件:25-28℃,好氧存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥97% (HPLC)

Streptomyces│fungicidicus 中文名稱:殺真菌素鏈霉菌種屬:Streptomyces│fungicidicus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:Type strain; Produces fungicidin培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:38生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:試劑級(jí)

Pseudomonas│putida 中文名稱:惡臭假單孢菌種屬:Pseudomonas│putida提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于微生物驅(qū)油及含油污處理培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:≥99%

Lactobacillus│delbrueckii subsp.bulgaricus 中文名稱:德式乳桿菌保加利亞亞種種屬:Lactobacillus│delbrueckii subsp.bulgaricus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:6生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:≥99%

Bosea│massiliensis 中文名稱:馬賽博斯氏菌種屬:Bosea│massiliensis分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:848生長(zhǎng)條件:18℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98%

Paenibacillus│pabuli 中文名稱:飼料類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│pabuli分離基物:綠色或發(fā)酵的飼料提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:533生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 丹毒絲菌屬通用 PCR檢測(cè)試劑盒 50T
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