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帕臘南病毒PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2020-11-16
點擊次數:
782
產品特點:
帕臘南病毒PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
  50T帕臘南病毒PCR檢測試劑盒說明書的詳細資料:

實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

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產品名稱

帕臘南病毒PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Paranavirus(PARV)RTPCR

 貨號

 HE31349-R

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優勢:
    1.   特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
彩虹245plus廣譜蛋白Marker(5-245KD)  20T(100ul) 別名 預染彩虹蛋白marker英文名稱 ColorMixed Protein Marker(5-245KD)儲存條件 -20℃,有效期2年單位 支產品特點: l 三色預染,顏色鮮亮,條帶整齊,便于觀察。 l 穩定性能突出,經檢測4℃放置兩年無明顯降解。 l 用量少,節約成本,僅5ul即可完美呈現(1.5mm,10孔梳)。 l 廣譜多帶,一支即可滿足多種實驗需求。 產品簡介: 本產品包含13種彩色預染的已知分子量標準蛋白,分子量范圍為5kD-245kD,每種蛋白含量約為0.2-0.4mg/ml。預染marker可以用于直接觀察蛋白質電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉膜效果。經SDS-PAGE凝膠電泳或轉移到PVDF或NC膜上可得到清晰的10條彩色蛋白條帶,其中25kD為綠色條帶,75kD為紅色條帶,其余10條是藍色條帶。 

超低分子量蛋白質Marker(3.3-20.1kDa)  15T 英文名稱 Protein Marker(3.3kD-20.1kD)儲存條件 -20℃,有效期1年單位 支產品簡介: 本產品包含3種多肽和2種低分子量蛋白質組成,分子量范圍為3. 3kD-20. 1kD。 可以用來判斷SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品為蛋白質和多肽混合物的凍干粉,每種蛋白含量約為15-22.5μg,配有一支1×上樣緩沖液。 凝膠制備及染色注意事項: 1. 先配制分離膠,聚合后再配制夾層膠,后配制濃縮膠,3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時,30v跑1-2小時后,待指示前沿到達分離膠上沿時,把電壓調至100v,至電泳結束,整個電泳過程大約需要6-8小時。 2. 由于多肽所含的氨基酸數目較少,因此如該多肽含有過多的極性氨基酸(堿性或酸性),則會影響其在SDS-PAGE圖上的條帶遷移率,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。 3. 由于SDS-PAGE的圖譜上,蛋白質對數分子量和遷移率成正比直線關系的分子量范圍為15,000-200,000,因此對于分子量小于10000的蛋白質或多肽的分子量,只能根據標準分子量進行估計,推斷其是否落入預測的分子量范圍。 4. 由于超低分子量多肽(3000及3000以下),極易從凝膠上浸出,因此染色及脫色時間不宜太長,脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過久,否則條帶會消失。 5. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20分鐘,再進行染色,能得到較好的蛋白條帶;如時間不允許,也可不進行固定直接染色。如果使用配方7進行染色時效果不好或考慮其毒性,請選擇本公司的考馬斯亮藍蛋白膠快速染色液(貨號:P1300),該產品具有染色快,無毒,靈敏性高等特點,是常規染色液的替代品。 

1M DTT溶液/二硫蘇糖醇  1ml 別名 二硫蘇糖醇;1,4-二硫代-DL-蘇糖醇;1,4-二巰基-DL-蘇糖醇;1,4-二巰基-2,3-丁二醇;英文名稱 1,4-Dithio-DL-threitol;Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol分子式 C4H10O2S2分子量 154.25儲存條件 -20℃,有效期1年單位 瓶DTT即DL-Dithiothreitol,中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2,分子量為154.25,純度>99%。常用還原劑,有抗氧化作用,進口分裝。DTT和巰基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性氣味要小很多,毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時,兩者效果相近,但DTT價格略高一些。是一種還原蛋白質S-S鍵的試劑;生化研究用作巰基保護劑;酶的專一性抑制劑;測定酶活力。 

預染超低分子量蛋白質Marker(3.3kD-31.0kD)  20T 英文名稱 Prestained Protein Marker(3.3kD-31.0kD)儲存條件 -20℃,有效期1年產品簡介 本產品包含預染的3種多肽和2種低分子量蛋白質組成,分子量范圍為3. 3kD-31. 0kD。可以用于直接觀察蛋白質電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉膜效果。經Tricine-甘油SDS-PAGE凝膠電泳時以及轉移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5條藍色的蛋白條帶。本品為蛋白質和多肽混合物的凍干粉,每種預染蛋白含量約為40μg,配有一支1×上樣緩沖液。 使用說明: 1. 開封后,溶于200 μ1 1×上樣緩沖液,可根據需要進行小量分裝,每管10 μl,-20℃貯存,每次取一管使用,避免反復凍融。 2. 使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳。 

4×SDS-PAGE分離膠緩沖液(PH=8.8)  100ml 英文名稱 SDS-PAGE Separating Gel Buffer,4×(pH 8.8)儲存條件 RT,有效期1年本試劑是由Tris和SDS混合而成的,主要用于SDS-PAGE凝膠(變性聚丙烯酰胺凝膠)制備實驗。配制分離膠時,10ml制膠體系中加入2.5ml(4倍稀釋)。 組分                              濃度 Tris-HCl(pH=8.8)    1.5mol/L  SDS                              0.4%(W/V) 
帕臘南病毒PCR檢測試劑盒說明書磷化蛋白激酶AKT1抗體Dictamnine別名: 分子式: C12H9NO2性狀: Powder純度: 99.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫

磷化蛋白激酶AKT1抗體Melatonin別名: 分子式: C13H16N2O2性狀: Powder純度: 99.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫

磷化蛋白激酶AKT1抗體L-Carnitine別名: 分子式: C7H15NO3性狀: Powder純度: 99.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫

乙醛脫氫酶2型抗體Glutathione別名: 分子式: C10H17N3O6S性狀: Powder純度: 98.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫

γ-氨基丁醛脫氫酶抗體trahydropalmatine別名: (+)-trahydropalmatine; 右旋四氫巴馬汀分子式: C21H25NO4性狀: Powder純度: 98.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 止痛;鎮靜;催眠;紫堇屬;小檗堿;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫

衰老相關蛋白5抗體Aglain B別名: 分子式: C36H42N2O8性狀: Powder純度: 96.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 米仔蘭屬;植物提取物;天然產物;天然產物庫

磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質/α-晶體蛋白b鏈抗體(-)-Corlumine別名: 分子式: C21H21NO6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: GABA拮抗劑;驚厥劑;紫堇屬;植物提取物;天然產物;天然產物庫

釉基質蛋白抗體Conquinamine別名: Epiquinamine分子式: C19H24N2O2性狀: Brown powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 金雞納屬;植物提取物;天然產物;天然產物庫 

產品相關關鍵字: 帕臘南病毒 PCR檢測試劑盒 50T
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